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牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必需的營養(yǎng)成分,常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到祛毒作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細(xì)胞不受傷害。血清,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用:1.血清提供:營養(yǎng)和能量來源;生長和粘附因子;肽和類固醇;載體蛋白。2.保護細(xì)胞:免受蛋白酶、毒性物質(zhì)、PH值波動、機械剪切力、氧化及自由基的損傷。作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、和各種生長因子、結(jié)合蛋白、促接觸和生長因子。貴州羊血清生產(chǎn)商
血清保存方法1.如何保存血清?血清應(yīng)該在-20℃保存。如果一次無法用完一瓶,應(yīng)該無菌分裝后冷凍保存。注意避免反復(fù)凍融。2.為什么儲存在冰箱中的血清會出現(xiàn)沉淀?有些胎牛血清產(chǎn)品沒有預(yù)老化,儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會影響血清的質(zhì)量。推薦在-20℃儲存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。凍融方法正確解凍方法:將血清首先置于冰箱2-8℃中12-24小時,使之緩慢部分溶解,然后再放在室溫下使之全溶。注意:溶解過程中要每隔一段時間緩慢地?fù)u動血清使之混勻。切記:避免37℃水浴。溫州動物血清哪里有賣注意:不要以過濾的方式去除這些絮狀沉淀物,因為這可能阻塞濾膜。
將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。如果在37℃或更高的溫度解凍血清,血清中會出現(xiàn)沉淀。此沉淀可能包括磷酸鈣結(jié)晶,但不改變血清的性能,同樣血清熱滅活也會導(dǎo)致沉淀的形成。渾濁和沉淀所有的血清可能保留一些纖維蛋白原。某些外部因素可能引發(fā)纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白,導(dǎo)致血清解凍后可能會觀察到絮狀物或混濁。這些物質(zhì)的存在不會改變血清的性能。如果想去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝到無菌離心管中,以低速離心1~2min,上清液即可直接加入到培養(yǎng)基內(nèi)使用。注意:不要以過濾的方式去除這些絮狀沉淀物,因為這可能阻塞濾膜。
血清是否需要熱滅活?關(guān)于血清熱滅活的問題,我們也有詳細(xì)的介紹:血清滅活之爭?一篇答疑解惑!血清使用小技巧(二)總結(jié)起來就是,熱滅活的目的是消滅補體,由于胎牛血清會嚴(yán)格控制取血時間為5-8月齡的胎牛,此時還未形成完整的補體系統(tǒng),因此,合格的胎牛血清,是不需要滅活的。但是新生牛血清、小牛血清、豬血清和馬血清這些血清則需要根據(jù)實驗要求而定。根據(jù)血清廠家多年來總結(jié)的經(jīng)驗,常規(guī)解凍后,40℃水浴加熱20分鐘即可,能夠很大程度地保留營養(yǎng)成分。至于某一株細(xì)胞適應(yīng)什么樣的血清濃度,還需要根據(jù)細(xì)胞特性、實驗?zāi)康淖鰷y試和調(diào)校。
去脂胎牛血清(貨號:C3840-0050/0100/0500/0050X10)去脂胎牛血清通過固體基質(zhì)脫脂作用去除內(nèi)源性脂類、甘油三酯和膽固醇,含量只為標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清的1/3。去脂胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中用量較多,其含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成分,常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物以及主要的低分子營養(yǎng)物。提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱源質(zhì)結(jié)合,起到作用。是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基上所需因子來源。起酸堿緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時剩余胰蛋白酶失活,保護細(xì)胞不受傷害。去脂胎牛血清可用于蛋白激酶CK2-α’與腺樣囊性肺轉(zhuǎn)移相關(guān)性研究:所有的血清可能保留一些纖維蛋白原。江蘇牛血清價格
原則上血清添加量不要太多,通常分為5%、10%、20%幾檔。貴州羊血清生產(chǎn)商
血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展,但仍存在一些問題,主要是:一、血清的成份可能有幾百種之多,目前對其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、和脂類等尚未充分認(rèn)識,這給研究工作帶來許多困難;二、血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制;三、不能排除血清中含有易變物質(zhì),這被認(rèn)為是“瓶中惡化”的原因之一。貴州羊血清生產(chǎn)商
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